请问水通道蛋白要用什么裂解液提取

水通道蛋白(aquaporin)是细胞膜上的一种蛋白通道,用于调控水分子通过细胞膜的通透性。要提取水通道蛋白,通常需要使用一定的裂解液来裂解细胞,释放出膜蛋白和其他细胞内蛋白质和分子。

水通道蛋白提取常用的裂解液主要有:

1. 含有轻度非离子型表面活性剂的磷酸盐缓冲液,如Triton X-100。此种缓冲液可以温和地裂解细胞膜,释放膜蛋白,同时保留蛋白的生物学活性。浓度一般在0.05-0.5%之间。

2. 含有更强烈离子型表面活性剂的SDS-PAGE裂解液,如SDS裂解液。此种裂解液可以完全破坏细胞膜和蛋白质间的非共价相互作用,使蛋白完全变性并且变为单一条带。但会使蛋白生物学活性丢失。

3. 高浓度的脲类溶剂,如6-8M的尿素。尿素可以通过破坏氢键和疏水相互作用来完全解折叠蛋白质,使其变性。同样会使生物学活性丢失。

4.  extremes of pH, 如pH为2-3的盐酸或pH为12-13的氢氧化钠。非理想pH可以改变蛋白质电荷状态,导致蛋白质结构改变和活性丢失。

所以要综合考虑,如果要保留水通道蛋白的生物学活性,推荐使用Triton X-100等温和的非离子型表面活性剂;如果仅仅为了蛋白定量或Western blot,可以使用比较强力的SDS等离子型表面活性剂。希望这能对您有所帮助!