问:
请教一下~请问abi 7500 荧光定量pcr仪需要多长时间校准一次荧光呢?
答:
abi 7500荧光定量PCR仪作为实验室常用的实时荧光定量PCR仪器,为保证其检测结果的准确可靠,需要进行定期的荧光校准。
1. abi 7500荧光定量PCR仪器推荐每天开机前进行荧光校准,开机后也需要定期不定期进行校准,一般在仪器连续工作4-6小时后再进行校准比较合适。
2. abi 7500的荧光校准主要是对荧光通道进行校准,包括FAM通道(蓝色)、VIC通道(绿色)和ROX通道(橙色)。校准使用的试剂盒为ABI公司的默认校准试剂cTaqMan Assays,或者第三方的校准试剂wiePlex qpcr Calibration kit 等。
3. abi 7500荧光校准的操作步骤主要包括:
1)安装校准板,开机预热仪器15分钟;
2)定制荧光校准的运行程序,设定相关参数如通道设置、循环条件、校准试剂的拷贝数等;
3)加载校准试剂到仪器,开始运行校准程序;
4)校准结束后查看结果,如CT值在预设范围内则校准成功,否则需要重新校准;
5)重新校准2-3次后仍不成功,可能与仪器或试剂有问题,需要联系技术支持。
4. abi 7500的荧光校准通常需要30-60分钟完成,视校准的通道数和具体参数而定。光学系统稳定需要预热15分钟,每次校准运行约需10-15分钟。
所以,总体来说,abi 7500荧光定量PCR仪在正常使用情况下,每天开机前进行一次全通道荧光校准是比较合理的,预计需要45-75分钟左右的时间进行完成。有任何问题可以回复提问。