问:
怎么判断ffa损伤肝细胞体外造模成功
答:
对ffa损伤肝细胞体外造模成功的判断主要从以下几个方面:
1. 细胞形态学变化。ffa损伤后,肝细胞会出现明显的细胞凋亡,细胞膨胀、脱垢,细胞ufficient和核囊肿等,这表明ffa起到了细胞毒作用。
2. ALT和AST活性上升。ffa导致肝细胞膜和内质网损伤会引起ALT和AST外泄入血,所以造模成功后检测培养上清中ALT和AST的活性会明显上升。
3. LDH活性增加。细胞受损时,LDH会大量释放出来,所以LDH活性的增加也证明细胞受到严重损伤。
4. MDA含量升高。ffa通过脂质过氧化作用损伤细胞膜,产生大量MDA,所以MDA含量的增加可以判断ffa诱导的氧化损伤成功。
5. SOD和GSH-Px活性下降。ffa损伤后,肝细胞内抗氧化酶的活性会下降,这也是判断ffa成功诱导氧化损伤的指标之一。
6. 细胞存活率下降。ffa损伤肝细胞后,细胞活力和存活率会降低,所以CCK-8法检测细胞活力,MTT法检测细胞存活率下降也可以判断ffa损伤成功。
7. 细胞DNA损伤。ffa诱导的氧化损伤会引起DNA断裂,采用彗星实验检测DNA损伤程度,DNA尾部的加长和尾矩的增加显示DNA明显损伤,说明ffa成功损伤了细胞。
综上,判断ffa损伤肝细胞体外造模成功主要依据细胞形态学变化,ALT/AST升高,LDH/MDA增加及SOD/GSH-Px下降,细胞活力和存活率降低以及DNA损伤程度的增加等指标来确定。多个指标的变化越显著,说明ffa对肝细胞的损伤越成功。