问:
质粒DNA琼脂糖凝胶电泳的顺序是什么?
答:
质粒DNA琼脂糖凝胶电泳的具体操作步骤如下:
1. 准备凝胶液:按需配制适当浓度的琼脂糖凝胶溶液,加热溶解,然后倒入凝胶模具中进行聚合。
2. 样本处理:取少量质粒DNA样本,加上6X DNA上样缓冲液,混合均匀,然后进行70°C热化散链处理。
3. 上样:将处理好的样本缓慢注入凝胶样本凹槽中。可以同时上样 DNA marker 作为分子量标准。
4. 电泳:将凝胶放入电泳槽,浸没在缓冲溶液中,连接电源进行电泳, 根据DNA大小不同选择合适电压和时间。
5. 染色:电泳结束后,使用溴化乙锭或类似染料对凝胶进行染色,使DNA带可见。
6. 凝胶观察:最后将凝胶在紫外线下进行观察,根据 DNA marker 对应的带位判断样本DNA大小。
7. 结果记录:可以拍照保存琼脂糖凝胶电泳图,也可以直接记录或摘录所需的结果。
8. 凝胶处理:用过的琼脂糖凝胶按规范处理,一般可以直接进行高压高温灭菌处理。
总结起来,就是准备凝胶 - 样本处理 - 上样 - 电泳 - 染色 - 观察 - 记录结果 - 凝胶处理,这就是质粒DNA琼脂糖凝胶电泳的主要步骤。