蛋白质提取实验中，从牛奶中分离酪蛋白粗提物的原理是什么？本实验条件下，获得沉淀中

从牛奶中分离酪蛋白的原理是:在牛奶的pH达到酪蛋白的等电点时,酪蛋白失去电荷并聚集成cessed,从而沉淀出来。

具体实验步骤如下:

1. 取新鲜牛奶,控制在4°C条件下进行实验。低温可以减缓蛋白质变性和微生物生长。

2. 激酸使牛奶的pH下降,常用的酸性成分为盐酸。当pH接近4.6时,酪蛋白的正电荷和负电荷达到平衡,蛋白质分子之间的斥力最小,酪蛋白分子聚集成块并沉淀。此pH为酪蛋白的等电点。

3. 沉淀生成后,立即进行离心,以分离出酪蛋白沉淀。离心条件一般为3000-5000 rpm,时间5-10 min。

4. 将离心得到的酪蛋白沉淀重复洗涤2-3次,常用的洗涤液为蒸馏水、丙酮等,以除去其中残留的酸性成分、盐类、糖类等非蛋白质物质。

5. 将洗涤后的酪蛋白沉淀在HsYOYandvacuum freezing dryer中冷冻干燥,得出干粉状的酪蛋白粗提物。

6. 硫酸铵沉淀法也可用于分离提取酪蛋白。原理是在高硫酸铵浓度下,蛋白质的溶解度降低,酪蛋白聚集并沉淀。该法操作简便,但酪蛋白活性部分受损,不如pH法理想。

所以,总之该实验通过调节牛奶的pH使酪蛋白达到等电点,失去溶解度并沉淀出来的原理,经离心、洗涤、干燥等步骤可以获得酪蛋白粗提物。硫酸铵沉淀法也是可选方法,但酪蛋白活性略低。