问:
测定样品中蛋白质含量的方法是
答:
测定样品中蛋白质含量的常用方法有:
1. 考马斯亮蓝法(Coomassie Brilliant Blue方法)
原理是考马斯亮蓝G-250能与蛋白质结合,形成颜色深蓝的复合物,通过测定这个复合物的吸光度,可以算出样品中的蛋白质含量。操作简单,重复性好。
2. 生化法
利用蛋白质可以和某些化合物发生特异性反应的原理,形成有色产物,通过颜色强度测定蛋白质含量。例如利用肽链中的氨基酸与羟苯二酚反应形成有色产物,或利用肽链中的色氨酸与甲醛反应等。
3. 法宁法
利用蛋白质对酚类化合物的沉淀作用,测量沉淀后上清液中残留的酚类化合物,从而推断出蛋白质的含量。常用菲林试剂。
4. 紫外分光光度法
测定样品在280nm和260nm处的吸光度,根据吸光度比值计算蛋白质浓度。该方法利用了蛋白质中的芳香族氨基酸具有280nm的特征吸收峰的原理。
5. 涡旋比色法
利用不同蛋白质溶液粘度不同的原理,通过比浊仪测定其粘度,经标准曲线计算蛋白含量。仪器需求较高,准确度也低些。
综上所述,这些都是常见的测定蛋白质含量的分析化学方法,各有优劣。实验时可根据具体情况选择使用。