问:
求木素含量的测定方法为什么紫外280nm处可以测定木质素浓度
答:
木质素含量的测定方法可以采用紫外分光光度法,280nm波长附近是木质素的最大吸收波长,所以在280nm处测定吸光度可以间接测定样品中的木质素浓度。这是基于比色法的测定原理。
具体原因有以下几个方面:
1. 木质素本身具有较强的紫外吸收能力,特别是在280nm附近有一个很强的吸收峰,这使得280nm成为测定木质素的理想波长。
2. 280nm是蛋白质和核酸基本不吸收的波长,所以在280nm下测得的吸光度主要由木质素决定,少受其他成分的影响,因此可以更加准确的反映木质素的含量。
3. 标准曲线法需要选择一个测定波长和一个标准品,280nm作为测定波长,选择木质素标准品绘制标准曲线,然后测定各样品在280nm下的吸光度,根据标准曲线计算出样品中的木质素浓度,达到定量测定的目的。
4. 比色定量要求在选定的波长下,样品和标准品的吸光度之比与其质量浓度之比成线性关系,280nm为木质素的最大吸收波长,在此波长下木质素的比色定量效果最好,线性关系最为明显。
5. 紫外分光光度计操作简单,280nm处的光学 pathway 也较短,对样品要求不高,可见度范围内的各种浓度都可以测定,适用于各种样品矩阵,应用广泛。
所以,总之280nm附近是木质素最强烈的吸收波长,在此波长下测定吸光度可以较准确地反映木质素的浓度,这就是为什么280nm处可以用来测定木质素含量的原因。