制作口腔上皮装片的过程

制作口腔上皮组织切片的过程如下:

1. 取材。从口腔正常部位切取约1mm×1mm的组织片,放在标本瓶中,口腔上皮组织表面应粘附在标本瓶底部。

2. 固定。加入10%中性缓冲福尔马林固定液,4°C保存24小时。固定液的作用是使组织结构和细胞保持生前状态。

3. 去水。取出组织,用70%乙醇脱水,脱水时间根据组织块的大小确定,通常为1-2小时。去水的目的是除去组织内的水分,为后续包埋过程做准备。

4. 清理。75%乙醇中漂洗1小时,去除固定液,然后用蒸馏水漂洗30分钟。

5. 脱钙。0.5%EDTA联合0.2M醋酸钠溶液中漂洗3天,去除组织块中的钙质。

6. 包埋。用石蜡将组织块包埋,置于56°C炉中石蜡全融,然后取出置于冰上迅速凝固,迅速构成组织块和石蜡的包埋块。

7. 制片。使用滑动微量制片机将包埋块切制成4μm厚度的连续切片。

8. 贴片。将切片浸入蒸馏水中展平松弛,捞起置于镜片上,去除过量水分,在加热板上定形,干燥。

9. 染色。常用的染色方法为苏木精-伊红染色, Briefly,切片染色过程:硫酸铁mj染色液染色2-3min;苏木精对比染色30s;伊红对比染色30s;二水洗;氢氧化钠蓝化30s;二水洗;95%酒精脱水; Gambion灌封。

10. 镜检。在光学显微镜下观察口腔上皮细胞及其细胞器的形态和结构。

以上为口腔上皮组织切片常规制作过程,染色方法可以选择其他染色,但是固定和包埋过程是制作过程的关键,必须严格控制,以获得高质量的口腔上皮切片。